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以下是干冰寄送的冻存细胞的处理步骤：

  收到细胞后的初步检查  

1.检查外包装：收到细胞后，先检查外包装是否完整，有无破损或变形。

2.检查冻存管状态：打开包装，查看干冰是否还有剩余，冻存管是否完好，是否有解冻现象。(若发现干冰完全汽化或冻存管有解冻迹象，需及时拍照并与供应商联系。)

图示：冻存管完好无破损，管内未出现解冻迹象，标签信息与出货单一致

  细胞复苏  

1.准备实验材料和环境：将15mL离心管、T25培养瓶、移液管等物品提前放入生物安全柜中，进行紫外照射30分钟消毒灭菌。同时，将细胞完全培养基提前30分钟放置在37℃水浴中预热备用。

2.快速解冻：将冻存管迅速放入37℃水浴锅中，轻轻摇晃，使细胞悬液在1-2分钟内完全溶解。

注：解冻时冻存管管口要高于水面，避免水流入管内引起污染。

3.消毒与转移：将冻存管擦干水分，用75%酒精消毒后，放入生物安全柜中。将冻存管中的细胞悬液转移到含有5mL完全培养基的15mL离心管中，轻轻混匀。

4.离心与重悬：将15mL离心管放入离心机，500 g离心5分钟。取出离心好的细胞，轻轻吸去上清，加入1mL完全培养基重悬细胞。

注：尽量吸干上清，避免冻存液对细胞的影响；

5.细胞培养：将重悬好的细胞悬液加入到准备好的T25培养瓶中，轻轻混匀，使细胞均匀分布。在显微镜下观察细胞状态及密度后，将培养瓶放入37℃培养箱中培养。

  细胞培养的后续操作  

1.依据细胞状态，在细胞贴壁后或24小时后进行换液或传代处理，继续培养。

图示：正常细胞复苏次日，细胞贴壁且恢复正常形态，少量圆形细胞及杂质漂浮与培养基中，换液即可

图示：细胞复苏次日，未见细胞贴壁或少量贴壁，培养基中存在大量杂质或细胞碎片，此时拍照反馈。若有少量贴壁，可换液尝试培养

2.观察与处理：在培养过程中，定期观察并记录细胞生长状态，以便及时发现并处理可能出现的问题。

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