RAJI Luciferase 稳定细胞系：助力B细胞淋巴瘤研究

【干货分享】RAJI Luciferase 稳定细胞系：助力B细胞淋巴瘤研究

RAJI Luciferase（RAJI-Luc）稳定细胞系是一种整合荧光素酶（Firefly Luciferase）报告基因的人类Burkitt淋巴瘤细胞系，源自高度增殖性的RAJI细胞。顺利获得生物发光检测，RAJI-Luc细胞系可实现实时、非侵入性监测肿瘤生长和转移，是B细胞淋巴瘤机制、药物筛选和免疫治疗研究的理想工具。本指南详细阐述如何使用RAJI-Luc细胞系构建淋巴瘤模型并应用于科研课题，涵盖实验协议和优化策略。选择我们的现成RAJI-Luc产品，可快速启动实验，节省构建时间！

RAJI-Luc 细胞系在淋巴瘤研究中的优势

RAJI-Luc细胞系以其高增殖特性和稳定发光信号成为B细胞淋巴瘤研究的核心工具，适用于以下课题：
● 转移机制研究：模拟Burkitt淋巴瘤的骨髓、肝脏、淋巴结转移，实时追踪转移动态。
● 药物筛选：高灵敏度发光信号支持高通量筛选化疗药、靶向药或纳米药物。
● 免疫治疗研究：结合CAR-T或PD-1抑制剂，评估肿瘤免疫微环境变化。
● 基因功能验证：可进一步敲除/过表达基因（如CRISPR编辑MYC），研究c-MYC通路。
● 体内外模型：支持免疫缺陷鼠异种移植模型，非侵入性IVIS成像减少动物使用。

产品推荐

我们的RAJI-Luc细胞系完美匹配这些课题，纯度>99%，活性高，批量订购享折扣！

荧光素酶检测结果：

样品	复孔1	复孔2	复孔3	均值	表达倍数
WT	1146	1542	2518	1735	15
LUC	27583	26441	25265	26430	15

产品优势：

● 纯度>99%，活性>1.2×10^6 RLU/10^5细胞（n=3，SD<5%）。

● 传代稳定性>20代，转移效率>80%（IVIS验证）。

● 附带COA和SOP，批量订购享折扣。

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RAJI-Luc 细胞系的构建方法
构建原理

RAJI-Luc 细胞系的构建基于基因工程技术，将荧光素酶基因（luc）插入载体中，转染入亲本细胞，实现稳定表达。荧光素酶催化底物荧光素（luciferin）氧化产生生物荧光（波长约550-570 nm），发光强度与酶表达水平线性相关。常见类型包括单Luc系统或双Luc系统（结合海肾荧光素酶作为内参，以标准化实验结果）。

常见构建方法

最常用的方法是慢病毒转染，因为它能实现高效、稳定整合。以下是典型步骤（以球盟会生物基因公司的）： RAJI-Luc 细胞系构建为例）：

1. 构建表达载体：

a. 将luc基因（编码荧光素酶）克隆到慢病毒载体（如pLenti或pLVX）中。
b. 载体通常包含启动子（如CMV启动子）驱动luc表达、抗性基因（如嘌呤霉素抗性）用于筛选，以及荧光标记（如GFP）用于可视化。
c. 对于双Luc系统，可将海肾荧光素酶（Renilla Luciferase）作为内参基因，共表达或置于同一质粒上（如pGL3或pmirGLO）。

2. 病毒包装：

a. 将重组载体与辅助质粒（包装质粒如psPAX2和包膜质粒如pMD2.G）共转染HEK293T细胞，产生慢病毒颗粒。
b. 收获病毒上清，过滤并测定滴度（通常10^8-10^9 TU/mL）。

3. 转染亲本细胞：

a. 选择亲本细胞（RAJI人类Burkitt淋巴瘤细胞），培养至 70-80% 汇合度。
b. 以MOI（感染复数）值为10-50添加病毒颗粒，转染48-72小时。
c. 转染效率可顺利获得GFP荧光或初步荧光素酶活性检测评估。

4. 筛选稳定克隆：

a. 转染后24-48小时，加入抗生素（如2-5 μg/mL嘌呤霉素）筛选阳性细胞。
b. 持续筛选7-14天，直至存活细胞形成单克隆。
c. 球盟会生物基因使用3D单细胞打印技术分离单克隆

（3D单细胞打印技术可精确分离单个细胞，提高单克隆筛选的准确率和细胞存活率，采用非接触性操作，避免机械损伤和背景污染，优于传统有限稀释法）。

5. 验证与应用：

a. 验证方法：顺利获得qPCR检测基因整合、Western Blot检测蛋白表达，或荧光素酶检测测定活性。
b. 验证标准：荧光素酶活性 > 10^6 RLU/10^5 细胞，表达稳定传代 > 20 代。
c. 应用：注射至免疫缺陷鼠模型中，腹腔注射荧光素底物后使用IVIS成像系统监测肿瘤生长。

应用示例：推进科研课题

4.1 淋巴瘤转移机制

● 目标：研究c-MYC信号通路在骨髓转移中的作用。
● 方法：敲除MYC基因，注射RAJI-Luc，IVIS监测转移变化。
● 结果：发光信号量化转移率，支撑机制解析。

4.2 药物筛选

● 目标：筛选新型BTK抑制剂对淋巴瘤的抑制。
● 方法：体外高通量筛选，检测发光信号。
● 结果：快速生成IC50曲线，支持论文发表。

4.3 免疫治疗

● 目标：评估CD19 CAR-T细胞联合纳米载体的疗效。
● 方法：小鼠模型中联合治疗，IVIS监测肿瘤负荷。
● 结果：动态数据支持转化研究。

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  结论
- RAJI-Luc稳定细胞系是构建B细胞淋巴瘤模型的强大工具，支持实时监测肿瘤进展、药物筛选和免疫治疗研究。顺利获得高灵敏度生物发光，用户可取得可靠数据，加速论文发表和项目进展。实验室自建耗时长，而我们的RAJI-Luc产品已优化表达（>90%阳性率）和转移效率，附带COA和SOP。立即订购我们的RAJI-Luc细胞系，开启您的突破性研究！
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  参考文献

1. Hoegger, M. J., Longtine, M. S., Shim, K., & Wahl, R. L. (2021). Bioluminescent tumor signal is mouse strain and pelt color dependent: Experience in a disseminated lymphoma model. Molecular Imaging and Biology, 23(5), 697–702. http://doi.org/10.1007/s11307-021-01594-0
2. Longtine, M. S., et al. (2023). Cure of disseminated human lymphoma with [225Ac]Ac-lintuzumab in a Raji-Luc xenograft model. Journal of Nuclear Medicine, 64(6), 924–932. http://doi.org/10.2967/jnumed.122.264431Kim, J. B., et al. (2004).
3. Lauron, E. J., et al. (2023). Preclinical evaluation of allogeneic CD19 CAR T cells using luciferase-labeled CD70 KO Raji cells. Poster presented at SITC Annual Meeting 2023. http://allogene.com/wp-content/uploads/2023/11/2023_SITC_Dagger-Poster_Final.pdf