Login
产品基本信息
LbuCas13a（又名C2c2）核酸酶来源于Leptotrichia buccalis菌株。LbuCas13a属于Ⅱ类Ⅵ型CRISPR系统效应蛋白，是由crRNA介导的核酸内切酶，在识别并切割靶标RNA时，其“附属切割”活性被激活，可非特异切割体系中单链 RNA(ssRNA)。顺利获得设计两端标记荧光基团或者其他标记物的RNA探针，可实现CRISPR/Cas13a对RNA模板的检测和信号放大。可顺利获得荧光仪或试纸观察结果。
产品组分
| 组分 | EDE0002-100 | EDE0002-500 | EDE0002-1000 |
| LbuCas13a Nuclease | 1 μM*100 μL (100pmol) | 1 μM*500 μL (500 pmol) | 1 μM*500 μL *2 管(1000 pmol) |
| LbuCas13a Cleavage Buffer (5×) | 500 μL*1 管 | 500 μL*4 管 | 1mL*4 管 |
反应体系
| 组分 | 终浓度 | 体积 ( μL) |
| 1 μM LbuCas13a | 50 nM | 1.25 |
| 5 × Cleavage Buffer | 1× | 5 |
| 25 U RNase Inhibitor | 1 U | 1 |
| 500 nM crRNA | 50 nM | 2.5 |
| 4 μM ssRNA Reporter | 400 nM | 2.5 |
| 1 μM RNA target | 50 nM | 1.25 |
| DEPC H2O | ||
| Total | 25 μL | 25 μL |
反应条件
使用实时荧光定量PCR仪或恒温扩增仪检测荧光信号，37℃反应，每 30 sec 采集一次荧光信号。
竞争性能交叉分析
图中横坐标为反应时间，纵坐标为Bio-rad CFX96荧光PCR仪检测结果。从图中可以看出，5×10^9 拷贝的目标 RNA 可以高效激活 LbuCas13a 酶，在 10 分钟内完全切割 RNA 报告探针，并达到荧光峰值。
不同浓度下 Cas13 附属切割的结果
储存条件及有效期
有效期1年，保存条件-20°C；如长期储存，建议置于-80°C。 建议根据使用次数进行分装，避免反复冻融。
联系电话
