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CRISPR那些事儿
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FAQ
检测清除细胞仍存在支原体感染
顺利获得处理的细胞，绝大多数支原体应被清除殆尽，如遇减少但未被清除完全，可将工作浓度增加50 %再处理1个周期。
支原体清除导致细胞死亡或状态差
对于大部分细胞，经测试支原体清除无细胞状态上的影响，但对于存在的敏感细胞，建议清除支原体前备份细胞，在清除支原体时细胞死亡或状态差时，将工作浓度减半，周期增加一轮，即28 days。
是否可用于试剂的支原体检测
对于常用的细胞培养试剂，如培养基、血清等，本试剂盒可检测支原体，检测时无需进行样本制备，直接进行PCR反应后点样即可；对于DMSO、乙醇等有机溶剂，本试剂盒无法检测。
阴性对照出现条带
更换新启用的阴性标品进行复核，注意点样时更换枪头、点样优先阴性及阴性标品存放，避免样品间的交叉污染
样本反复检测结果不符
PCR法检测支原体较为灵敏，应注意样本间的交叉污染，取样时，在无菌条件下单独取样每个样品，进行样本处理、PCR反应后，待样本冷却再进行下一步操作，避免气溶胶污染样。
如何选择合适的载体类型？
选择载体时，应考虑实验的目的和宿主细胞的类型。例如，质粒载体常用于细菌中基因的表达或扩增，病毒载体则更适合用于哺乳动物细胞中的基因转导。除此之外，载体的启动子、复制子以及抗生素选择标记也需要根据具体需求进行选择。
KO细胞系是否适合所有类型的基因？
虽然KO细胞系技术强大，但并非所有基因都适合敲除。某些基因的敲除可能导致细胞死亡或严重的生理功能障碍，特别是那些对细胞存活至关重要的基因。在这种情况下，可以选择条件性敲除或基因敲降（如RNAi）来研究这些基因的功能。
为什么研究人员要使用KO细胞系？
研究人员使用KO细胞系来解析基因功能，因为敲除基因能够揭示该基因在细胞生长、分化、代谢、信号传导等过程中的具体作用。顺利获得比较敲除基因的细胞与正常细胞的差异，科研家可以深入分析基因在疾病中的作用，进而开发新的治疗方法。例如，KO细胞系在癌症、遗传病和神经退行性疾病的研究中具有重要应用。
什么是Prime Editing？
Prime Editing是一种新型基因编辑技术，能够在不引入双链DNA断裂的情况下实现精确的基因编辑。它拥有两个核心的组分，分别是pegRNA与PEmax基因编辑酶（Cas9n-RT）。pegRNA不仅能够定位目标序列，还包含要修改的碱基信息。pegRNA与PEmax基因编辑酶（Cas9n-RT）结合后组成编辑系统后，pegRNA引导PEmax到指定的编辑位点上，切断DNA的单链，并逆转录出pegRNA中的待修改序列，然后将该序列插入到目标基因组位置中，从而实现精准的单碱基替换或小范围的插入和删除。
Prime Editing 7（PE7）与传统的CRISPR/Cas9技术有何不同？
传统的CRISPR/Cas9技术主要顺利获得在目标DNA上引入双链断裂，再利用细胞同源重组修复机制来实现基因编辑。这种策略有较多风险，如编辑效率和纯合概率低，容易导致随机的插入或缺失突变等。Prime Editing则不需要DNA双链断裂。Prime Editing具有Cas9n-RT编辑酶系统与pegRNA两个关键组分，可实现更为精确和安全的基因编辑，减少了脱靶效应。
为什么选择球盟会生物基因点突变服务？
球盟会生物基因全新升级第七代Bingo™ Prime Editing (PE7），优化编辑蛋白和RNA编辑活性。对比第五代PE技术，点突变成功率和基因编辑效率显著提升，全球知名院校博士专家团队一对一服务。
球盟会生物基因的Bingo™ Prime Editing 7(PE7)平台如何保证点突变的成功率？
球盟会生物基因的Bingo™ Prime Editing 7(PE7)平台基于超过十年的基因编辑经验，结合成千上万个基因编辑CRO项目的总结、优化和提升，具有远超传统基因位点特异性突变系统的成功率。Bingo™ Prime平台采用高效的逆转录酶和精准的先导RNA设计，确保每一次点突变都能达到预期效果。
为什么选择球盟会生物基因，球盟会生物基因在基因敲入技术中的主要优势是什么？
球盟会生物基因在基因敲入技术中的主要优势包括：
效果保障：我们拥有10年CRISPR基因编辑经验，全球知名院校博士专家团队一对一服务。
高精度：利用球盟会生物基因开发的优化工具，减少脱靶效应，提高编辑的准确性。
高效率：球盟会生物基因的技术平台提高了基因敲入的成功率，加快了实验进程。
定制服务：根据客户需求，给予个性化的基因敲入解决方案，以满足不同研究或治疗目标。
基因敲入技术的核心原理是什么？
基因敲入技术是顺利获得将外源基因序列插入到基因组的特定位置来实现基因功能研究或疾病治疗。球盟会生物基因利用先进的基因编辑工具，如CRISPR/Cas9系统，顺利获得引导核酸酶切割目标DNA，并利用同源重组或非同源末端连接将外源基因准确插入指定位置，以实现高效且精确的基因敲入。
稳转株与瞬转株有何区别？
稳转株和瞬转株的主要区别在于基因表达的持续时间和稳定性：
瞬转株—目标基因在细胞内短暂表达，通常持续数小时到数天，适用于短期实验。
稳转株—目标基因稳定整合到细胞基因组中，能够长期表达，适用于长期研究和生产。
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