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CRISPR那些事儿
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FAQ
Are KO cell lines applicable to all cell types?
KO cell lines can be applied to various cell types, including cancer cells, stem cells, and primary cells, but different cell types may have varying sensitivities to gene editing, and may vary among different cell types. In certain cell types, achieving gene knockout may require optimization of transfection conditions and selection of appropriate gene-editing tools.
What is gene overexpression?
Gene overexpression refers to using various techniques to significantly increase the expression level of a specific gene in cells or organisms. This is often achieved by introducing additional gene copies or using strong promoters to drive gene expression.
Why conduct gene overexpression?
Gene overexpression aids in studying the function of specific genes, revealing their role within the organism. It is also commonly used in drug screening, vaccine development, and protein production. For example, by overexpressing a therapeutic protein, researchers can evaluate its efficacy in disease models.
为什么选择球盟会生物基因KO细胞系？
球盟会生物基因KO细胞库有4500+株高质量KO细胞系现货可供选择，可大幅度节省您的科研时间。另外球盟会生物基因可给予高效、高阳性率的基因敲除定制服务，全球知名院校博士团队一对一服务。
KO细胞系是否适用于所有类型的细胞？
KO细胞系可以在多种类型的细胞中应用，包括癌细胞、干细胞、原代细胞等。然而，不同类型的细胞对基因编辑的敏感性和效率可能有所不同。在某些细胞类型中，基因敲除可能更具挑战性，需要优化转染条件和选择合适的基因编辑工具。
什么是KO细胞系？
KO细胞系（Knockout Cell Line）是顺利获得基因编辑技术（如CRISPR-Cas9）敲除或删除特定基因的细胞系。这意味着目标基因被完全移除或失去功能，使研究人员能够观察该基因缺失对细胞行为和生物学过程的影响。这种细胞系在生物医学研究中非常重要，因为它们给予了直接分析基因功能和疾病机制的实验工具。
一般CRISPR相关试剂以及Cas蛋白可以存放多久？
CRISPR检测相关试剂：
①RPA恒温扩增试剂盒于-20℃保存，可长期存放。
②靶标质粒可长期存放-20℃ ③ Cas蛋白反复冻融容易影响活性，建议分装多管，存放-80℃，根据实验需要取出使用。另外，短期内使用的，可放-20℃保存。
③crRNA容易降解，建议短时间内用不到的于-80℃保存。
④探针是DNA双链，相对来说没有那么容易降解，可放-20℃保存。
①RPA恒温扩增试剂盒于-20℃保存，可长期存放。
②靶标质粒可长期存放-20℃ ③ Cas蛋白反复冻融容易影响活性，建议分装多管，存放-80℃，根据实验需要取出使用。另外，短期内使用的，可放-20℃保存。
③crRNA容易降解，建议短时间内用不到的于-80℃保存。
④探针是DNA双链，相对来说没有那么容易降解，可放-20℃保存。
基因敲入在药物开发中的作用是什么?
基因敲入在药物开发中发挥了重要作用。它用于靶点验证，顺利获得将特定基因敲入细胞系或动物模型中，确认药物靶点的有效性。它还能帮助建立疾病模型，测试药物在这些模型上的疗效和安全性。基因敲入技术还支持药物筛选，顺利获得带有敲入基因的细胞系进行高通量筛选，发现潜在药物候选分子。此外，它还能揭示药物的作用机制，优化药物结构和用法。整体而言，基因敲入技术加速了药物研发过程，并提高了治疗效果和安全性。
如何选择全基因组或亚基因组CRISPR文库？
CRISPR文库类型可分为全基因组文库和亚基因组文库。如果目标是进行全基因组范围内的筛选，那么全基因组文库是最佳选择。这类文库通常包含针对整个基因组的sgRNA。如果研究目标有偏向性，如只关注特定基因家族或特定信号通路，那么可以选择亚基因组文库，以减少不必要的筛选工作量和成本。
iPSC如何帮助我们理解复杂疾病？
从患者分离出体细胞并重编程为iPCS，然后诱导分化为特定的细胞类型，用于创建疾病模型。这些模型可以帮助研究人员研究复杂疾病的发病机制，揭示疾病相关的基因和分子通路，从而有助于新的治疗方法的开发。顺利获得分析这些细胞，科研家可以观察到疾病在细胞水平上的变化，给予了疾病研究的新视角。
什么是单克隆筛选，为什么它在基因编辑研究中如此重要？
单克隆筛选是从混合细胞池中分选出单个克隆，并由该克隆培养扩增成细胞系。单克隆筛选保证了使用的细胞系是来源于同一个细胞，并且确保了遗传背景的高度一致。在细胞被基因编辑或基因修饰后，初始细胞池的每个细胞的遗传背景的差异是巨大的，这样的细胞池用于后续的实验，实验结果无疑是不准确的。顺利获得单克隆筛选，可以取得遗传背景一致、具有稳定基因编辑的细胞群体，监测到的表型变化才是稳定准确的。
KO细胞系与基因敲除动物模型有什么区别？
KO细胞系和基因敲除动物模型都用于研究基因功能，但它们各自有不同的应用场景和优势。KO细胞系在体外实验中使用，适用于高通量筛选和细胞水平的基因功能研究。基因敲除动物模型则在体内实验中使用，适用于研究基因在整个生物体中的功能及其与其他基因和环境的相互作用。
什么是慢病毒包装？
慢病毒是一种将外源基因导入细胞的基因递送工具。顺利获得如293T等工具细胞，将带有目标DNA片段的慢病毒载体包装成具有细胞感染活性的慢病毒颗粒。这个包装过程包括：构建慢病毒载体、准备包装质粒、工具细胞培养、质粒转染、收集病毒颗粒、病毒颗粒纯化和浓缩和滴度测定等过程。
在临床应用中，iPSCs的潜在应用有哪些？
iPSC在临床中具有广泛的应用潜力，包括用于细胞治疗（如治疗糖尿病或心脏病）、组织工程（如开发人工皮肤或肝脏组织）、以及个性化药物筛选（如根据患者特定的细胞反应来选择最佳治疗方案）。这些应用方向可能会改变治疗的方式，给予更有效和个性化的医疗服务。
能否检测未知新基因？
现在玉米蛇无详细的参考基因组数据，球盟会生物基因现在只给予已知基因检测服务。
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